Jdi na obsah Jdi na menu
 


Příprava trvalého bakteriologického preparátu

6. 8. 2018

Příprava trvalého bakteriologického preparátu je konečnou fází, kterou může bakteriologický preparát absolvovat, chceme-li jej trvale uchovat. De facto lze trvalým praparátem nazvat i fixovaný a obarvený bakteriologický preparát. Takový preparát má však zásadní nedostatek, a tím je nedostatečná mechanická odolnost. Nátěr bakterií se při neopatrné manipulaci nebo při stírání zbytků imerzního oleje nenávratně poškodí. Abychom tomu předešli, je vhodné preparáty, které chceme nadále uchovat, zamontovat do zalévacího média.

Ze spektra zalévacích médií volíme média ve vodě nerozpustná, jelikož ve vodě rozpustná média mohou rozpouštět barviva, kterými jsou obarveny bakterie a preparát by tak ztrácel kontrast. Z nejčastěji nabízených médií můžeme vybrat např. kanadský balzám, Entellan, Solakryl BMX. Kanadský balzám má vysoký index lomu, takže je preparát velice projasněný, avšak pomalu tuhne. I po týdnech tuhnutí při běžné teplotě je stále tekutý. Oproti tomu syntetické pryskiřice (Solakryl) rychle tuhnou (kompletně utuhnnou do několika týdnů).

K přípravě trvalého bakteriologického preparátu je zapotřebí pouze již připravený bakteriologický preparát, odmaštěné krycí sklo vhodné velikosti, zalévací médium, skleněná tyčinka na nebírání média a případně xylen. Postup uzavírání preparátů vypadá následovně:

  1. Suchý bakteriologický preparát necháme na několik minut v xylenu. Tento krok není v případě bakteriologického nátěru nutný, ale xylen preparát lehce projasní a nacíc usnadní pronikání montovacího média do preparátu.
  2. Preparát necháme oschnout, případně xylen odstraníme jemně pomocí filtračního papíru.
  3. Na preparát naneseme několik kapek montovacího média (dle velikosti preparátu) tak, abychom nevytvořili vzduchové bubliny. Eventuálně vzniklé vzduchové bubliny lze odstranit dotykem horké jehly.
  4. Preparát přiklopíme krycím sklem tak, aby nevznikly vzduchové bubliny. Nejlepším způsobem je pomalý posun krycího skla v šikmé poloze po podložním skle ke kapce zalévacího média, a po rozlinutí média po hraně krycího skla pomalé přiklopení na podložní sklo (pomoci si můžeme podepřením krycího skla preparační jehlou).
  5. Počkáme, až se montovací médium rozlije po celé ploše. Poté můžeme krycí sklo preparační jehlou posunout do finální polohy.
  6. Ve vodorovné poloze necháme médium utuhnout. Po zaschutí skalpelem odstraníme případné části média, které přetekly přes okraj krycího skla.

Oprti přípravě jiných trvalých preparátů (např. histologických, rostlinných...) není zapotřebí u bakteriologických preparátu absolvovat odvodňování. Suché bakteriologické preparáty obsahují jen velice málo vody, které neovlivní kvalitu výsledku.