Acidorezistentní barvení
Některé bakterie (zejména rody Mycobacterium a Nocardia) obsahují ve své buněčné stěně význačný podíl lipidů a mykolových kyselin, což bakterie disponuje k určitým charakteristickým znakům. Většina mykobakterií roste v důsledku pomalého příjmu živin velmi pomalu (doba kultivace až 6 týdnů), není to však pravidlem. Vlivem specifické stavby buněčné stěny jsou tyto bakterie acidorezistentní. Díky této vlastnosti můžeme selektivně tyto bakterie obarvit. Metoda acidorezistentního barvení dle Ziehl-Neelsona spočívá v intenzivní saturaci všech buněk v preparátu karbolfuchsinem (po této agresivní proceduře se obarví i acidorezistentní bakterie), následného odbarvení kyselým alkoholem (ten nevstoupí do acidorezistentních bakterií, odbarví vše ostatní) a konečně v dobarvení kontrastním barvivem.
Postup barvení dle Ziehl-Neelsona
Připravíme preparát bakterií běžným způsobem a běžným způsobem jej fixujeme. Preparát se převrství karbolfuchsinem dle Ziehl-Neelsona a zahříváme nad plamenem do výstupu par. Barvivo nesmí za žádných okolností vřít ani vyschnot. Poté barvivo slijeme a celý postup opakujeme třikrát. Po posledním barvení karbolfuchsinem odbarvujeme preparát kyselým alkoholem dokud se bude odtékající alkohol barvit. Následně se preparát lehce propláchne vodou a konečně se prevrství roztokem kontrastního barviva (methylenová modř, malachitová zeleň) a nechá se 20 s působit. Závěrem slijeme přebytečné barvivo, preparát vypláchneme vodou a necháme usušit. Pozorujeme červené acidorezistentní bakterie, vše ostatní bude modré / zelené.
Barviva v receptáři.